壓力不穩(wěn)是液相色譜儀(HPLC)常見(jiàn)的故障,其表現(xiàn):
?、賶毫υ谝欢螘r(shí)間逐漸變化(升高或降低);
②壓力瞬間變化(>3kg)。
總結(jié)原因不外乎以下四種情況:⑴有氣泡;(2)漏液;(3)單向閥不良;(4)泵工作相位不正確。
對(duì)于①這種情況:一般是在開(kāi)機(jī)的一段時(shí)間內(nèi)出現(xiàn),往往是流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)還沒(méi)有平衡好、柱箱溫度還沒(méi)有恒定。這些都不屬于儀器問(wèn)題,只要多平衡一會(huì)就會(huì)穩(wěn)定。若使用的是梯度程序,由于流動(dòng)相的比例正處在變化中,壓力也會(huì)跟隨變化。
對(duì)于第②種情況:通過(guò)下面幾步分析,很快就可以確定原因。
首先排除氣泡因素:氣泡的產(chǎn)生是由于流動(dòng)相中溶解了空氣,在泵壓的作用下空氣會(huì)分離出來(lái),氣泡留在泵體內(nèi)排不出去,它不僅影響到流量的準(zhǔn)確,泵壓也會(huì)不穩(wěn),這時(shí)我們只要打開(kāi)排廢閥,利用快速?zèng)_洗功能很快就能將氣泡趕出。為防止氣泡產(chǎn)生,好的辦法就是使用在線脫氣裝置。沒(méi)有脫氣機(jī)時(shí),流動(dòng)相要經(jīng)過(guò)脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法,雖然簡(jiǎn)單但效果不佳,不妨將流動(dòng)相用微孔濾膜多過(guò)濾兩遍,利用真空泵的負(fù)壓,將溶解在流動(dòng)相中的空氣釋放出來(lái),其效果要好些。如果使用中我們發(fā)現(xiàn),連接過(guò)濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動(dòng)時(shí),這說(shuō)明過(guò)濾頭有堵塞現(xiàn)象必須清洗,你可用10%的硝酸進(jìn)行超聲15分鐘,如果還有氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。
其次,要檢查的是輸液泵有沒(méi)有漏液現(xiàn)象,一般接在泵后的管道漏液會(huì)使壓力降低,對(duì)壓力穩(wěn)定性影響不大。如果泵內(nèi)柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了,它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀察到泵頭或沖洗管漏液(有沖洗瓶時(shí)液位會(huì)升高),柱塞墊或柱塞桿肯定有問(wèn)題。
第三是單向閥不良,當(dāng)有鹽份或者雜質(zhì)等污染物附著在單向閥內(nèi)球體和閥體表面時(shí),就會(huì)破壞密封性,造成輸液的單向性能降低,泵雖然在工作,但就是輸送不好液體,嚴(yán)重時(shí)不能輸液。反映到壓力上,表現(xiàn)為嚴(yán)重不穩(wěn)或沒(méi)有壓力。這時(shí)你可以卸下單向閥,用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份,再用熱水超聲清洗一遍效果會(huì)更好。若清洗后還達(dá)不到要求,可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結(jié)構(gòu)比較精細(xì),如果沒(méi)有把握好先不要分解清洗,用超聲波清洗時(shí)要注意擺放的位置防止部件震散,否則裝配后效果會(huì)不理想。當(dāng)單向閥內(nèi)的球體損傷時(shí)就只有更換了。
后,引起壓力不穩(wěn)還有一種情況,就是泵工作的相位存在問(wèn)題,這種情況發(fā)生的比較少,可以通過(guò)調(diào)節(jié)泵的初始位置解決。
以上四個(gè)方面基本包含了泵壓不穩(wěn)的所有原因,對(duì)于大多數(shù)用戶(hù)只要順著這個(gè)思路檢查,一般的故障都能得到解決。